
大鼠血漿乳酸脫氫酶(LDH)活性檢測實驗
發(fā)布時間:2025-12-27 / 瀏覽數(shù):38
實驗原理
LDH 可催化乳酸轉(zhuǎn)化為丙酮酸,同時將輔酶 I(NAD?)還原為 NADH,NADH 在 340nm 處有特征吸收峰,通過檢測吸光度的變化速率,可計算 LDH 的活性,LDH 活性升高常提示組織細(xì)胞損傷。
操作步驟
1. 反應(yīng)體系配制:在試管中加入緩沖液、乳酸溶液、NAD?溶液,混合均勻。
2. 啟動反應(yīng):加入 50μL 大鼠血漿,迅速混勻并放入分光光度計。
3. 動態(tài)檢測:記錄 340nm 處吸光度隨時間的變化,持續(xù) 3 分鐘。
4. 活性計算:根據(jù)吸光度變化速率和摩爾消光系數(shù),計算血漿中 LDH 的活性單位。
應(yīng)用
| 用于評估藥物、創(chuàng)傷等因素對大鼠心肌、肝臟等組織的損傷程度;輔助診斷感染、缺血等病理狀態(tài)下的組織細(xì)胞損傷情況。 |